叶绿体中色素的提取和分离实验目的(叶绿体中色素的提取和分离)

  • 发布时间:2023-11-25 15:30:32 来源:
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导读 你们好,最近小未来发现有诸多的小伙伴们对于叶绿体中色素的提取和分离实验目的,叶绿体中色素的提取和分离这个问题都颇为感兴趣的,今天小

你们好,最近小未来发现有诸多的小伙伴们对于叶绿体中色素的提取和分离实验目的,叶绿体中色素的提取和分离这个问题都颇为感兴趣的,今天小活为大家梳理了下,一起往下看看吧。

1、一、实验原理

2、1、(色素提取原理:色素溶于有机溶剂而不溶于水,可用95%的乙醇、丙酮等有机溶剂来溶解色 素,从而提取绿叶中的色素。色素提取也可用水浴加热法,即把叶片剪碎后放在95%的乙醇 中,进行隔水加热来提取。一般地说,叶片加热到变成黄白色,叶片中的色素基本上被提取出 来了。

3、2、(色素分离原理:各种色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散速度比 较快,反之则比较慢,从而使各种色素相互分离开来。

4、二、实验中几种化学药品的作用

5、95%的乙醇 :溶解色素,提取色素;

6、层析液 :分离绿叶中的色素 ;

7、二氧化硅 :增加杵棒与研钵间的摩擦力,破坏细胞结构,使研磨充分 ;

8、碳酸钙 :防止研磨过程中色素被破坏。

9、三、实验流程

10、(1)提取绿叶中的色素——研磨法

11、  称取、剪碎5g叶片,放入研钵中。加入少许二氧化硅、碳酸钙、5mL丙酮。快速、充分研磨。

12、  根据叶绿体中的色素在有机溶剂(乙醇、丙酮等)中溶解的特性,用丙酮可将色素从叶片中提取出来(若用95%的酒精作溶剂,则应向色素提取液中加入无水碳酸钠,除去色素提取液中的水分。若用丙酮作溶剂,则用量不宜过多,以2~5mL为宜,过多会影响色素浓度,过少不易过滤),过滤后收集滤液(将研磨液迅速倒入基部已放—块单层尼龙布的漏斗中过滤),将滤液收集到小试管中,及时用棉塞将试管塞紧备用。注:也可以不过滤,加入适量的丙酮把叶子研磨成糊糊状,再用载玻片(或木工用的竹笔)的一端蘸取研磨液直接点样即可。

13、(2)制备滤纸条

14、  将干燥过的定性滤纸剪成6 cm×l cm的条,一端剪去两角,距该端lcm处用铅笔画一条极细的横线。用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线,待干燥后再重复画2~3次(次数越多色素越多)。

15、(3)色素分离------纸层析法

16、  将干燥后的滤纸条画线一端朝下放入有少许 (2~3mL)层析液的烧杯中,盖上培养皿。

17、(4)观察层析后,取出滤纸条,烘干后观察色素分离情况。

18、(5)整理、洗手。

19、四、实验结果及分析

20、1、从色素带的宽度可推知色素含量的多少依次为:叶绿素a,叶绿素b,叶黄素,胡萝卜素。

21、2、从色素带的位置可推知色素在层析液中的溶解度大小依次为:胡萝卜素,叶黄素,叶绿素a, 叶绿素b。

22、五、实验中的注意事项

23、1、选材: 选取鲜嫩深绿的叶片,以保证含有较多的色素。

24、2、提取色素:研磨要迅速、充分,以保证提取较多的色素。

25、3、点样:用力要均匀,快慢要适中。滤液细线要细、直,且干燥后重复画3~4次,使滤液细线既 有较多的色素,又使各色素扩散的起点相同。

26、4、色素分离:滤纸上的滤液细线要高于层析液液面,不要触及层析液,以防色素溶解到层析液中,滤纸条上得不到色素带。

27、5、实验安全:本实验需接触层析液等有害物质,实验结束后一定要用肥皂将手洗净。

28、六、实验成功的关键

29、1、选取的叶片要新鲜、颜色要深绿,以保证含有较多的色素。

30、2、研磨要迅速、充分。叶绿素不稳定,易被活细胞内的叶绿素酶水解,因此要加碳酸钙,以防止色素被破坏。乙醇容易挥发,所以研磨要迅速。充分研磨使叶绿体完全破裂,从而提取较多 的色素。

31、3、滤液细线不仅要求细、直,而且要求含有较多的色素,所以要求待滤液干后再画2~3次。

32、4、滤液细线不能触及层析液,否则色素溶解到层析液中,滤纸条上得不到色素带。

33、七、色素提取液呈淡绿色的原因分析

34、1、选取材料不合适,色素含量较少。

35、2、研磨不充分,色素未能充分提取出来。

36、3、称取绿叶过少或加入乙醇过多,色素溶液浓度过低。

37、4、未加碳酸钙或加入过少,色素分子部分被破坏。

以上就是叶绿体中色素的提取和分离这篇文章的一些介绍,希望对大家有所帮助。

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